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產品目錄
RNA純化試劑盒操作說明書
發布時間:2022-06-23 點擊量:125

  

 

 

RNA純化試劑盒說明書

RNA Cleanup Kit

RNA純化試劑盒

 

Cat. No.   K0589

保存:室溫

 

組分說明

 

 

                                            Catalog no.             K0589

                                              Kit Size                 20

                                             Buffer RL               20 ml

                                    Buffer RW2concentrate)          11 ml

                                        RNase-Free Water             10 ml

                                          Spin Column RS               20

                                     Collection Tube1.5 ml)           20

                                     Collection Tube2 ml)             20

 

 

產品簡介

 

    本試劑盒使用*的離心吸附柱,在高鹽條件下 RNA 與硅基質膜高效、專一地結合,適用于從酶促反應及其他多種方法提取的 RNA 溶液中進一步純化和濃縮 RNA,并將 RNA 樣品進行脫鹽處理,有效回收得到高純度的 RNA。該試劑盒最小可以將 RNA 樣品濃縮至 30-50 µl,回收得到的 RNA 可直接用于微點陣分析和 Real-time PCR 等敏感實驗。

注意事項

 

1.  預防RNase污染,應注意以下幾方面:

 

1)使用無RNase的塑料制品和槍頭,避免交叉污染。

 

2)玻璃器皿應在使用前于180℃高溫下干烤4小時,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分鐘,用水徹底沖洗后高壓滅菌。

3)配制溶液應使用無RNase的水。

 

4)操作人員戴一次性口罩和手套,實驗過程中要勤換手套。

 

2.  第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明先在 Buffer RW2 中加入無水乙醇。

3.  Buffer RL 如果產生沉淀,請加熱使其溶解后放置。

 

4.  所有離心步驟均在室溫下進行,且所有操作步驟動作要迅速。

 

自備試劑:無水乙醇(新開封或提取RNA專用)  

 

 

操作步驟

 

 1.  RNA-Free Water 調整樣品至總體積至 100  μl,加入 350 μl Buffer RL,充分混勻。

 

 2.  加入 250  μl  無水乙醇,混勻。

 

 3.  將得到的溶液700  μl轉移到吸附柱(Spin Column RS)中(吸附柱已裝入收集管 2 ml Collection Tube  中),10,000rpm~11,500 x g)離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

 

 4.  向吸附柱中加入500  μl Buffer  RW2(用前檢查已加入無水乙醇), 10,000 rpm  離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

 

 5.  重復步驟4

 

 6.  將吸附柱放回收集管中,12,000 rpm離心1分鐘。

 

 7.  將吸附柱裝入新的RNase-Free 1.5ml收集管中,向吸附膜的中間部位加入30-50  μl RNase-Free Water,室溫放置1分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。

 

     注意:  RNase-Free Water最好在70℃預熱,確保RNA洗脫充分;洗脫體積不應小于30 μl,體積過小影響回收率。

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